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紫外可见分光光度计的应用
  紫外-可见分光光度法是一种广泛应用的定量分析方法,也是对物质进行定性分析和结构分析的一种手段,通用仪器为紫外可见分光光度计
  一、定性分析
  紫外可见分光光度法可用于有机化合物的鉴定、结构推断和纯度检验。但由于紫外可见光谱较为简单,光谱信息少,特征性不强,而且不少简单官能团在近紫外及可见光区没有吸收或吸收很弱,因此,这种方法的应用有较大的局限性。
  1、未知化合物的定性鉴定
  不同化合物往往在吸收光谱的形状、吸收峰的数目、位置和相应的摩尔吸光系数等方面表现出特征性,是定性鉴定的光谱依据,可采用光谱比较法进行定性鉴定。通常是在相同条件下,测定未知物和已知标准物的吸收光谱,并进行图谱对比,如果二者的图谱完全一致,则可初步认为待测物与标准物为同一种物质,如果没有标准物,可借助紫外可见标准图谱或有关电子光谱数据资料进行比较。
  2、有机化合物的结构推断
  紫外可见分光光度法可以进行化合物某些特征集团的判别,若在200~750nm区域内无吸收峰,则可能是直接烷烃、环烷烃、饱和脂肪族化合物或仅含一个双健的烯烃,若在270~300nm间有弱的吸收峰,且随熔剂极性增大而发生蓝移,则说明分子内含有羰基;若在184nm附近有强吸收带,在204nm附近有中强吸收带,在260nm附近有弱吸收带且有精细结构,说明含有苯环。
  3、化合物的纯度检验
  如果某些化合物在紫外区没有明显吸收峰,而其中的杂质有较强吸收峰,就能方便的检出该化合物中是否含有杂质。
  二、定量分析
  紫外可见分光度法常用于定量分析,根据测定波长的范围可分为可见分光光度定量分析法和紫外分光光度定量分析法。前者用于有色物质的测定,后者用于紫外吸收的物质的测定,两者的测定原理和步骤相同,通过测定溶液对一定波长入射光的吸光度,依据朗伯-比尔定律,就可求出溶液中物质的浓度或含量。
  1、单组分的定量分析
  如果只要求测定某一样品中一种组分,且在选定的测量波长下,其他组分没有 吸收即对该组分不干扰,则这种单组分分定量分析较为简单
  (1)吸光系数法(绝对法)。测定条件下,如果待测组分的吸光系数已知,可以通过测定溶液的吸光度,直接根据朗伯-比尔定律,求出组分的浓度或含量。
  (2)标准对照法
  (3)标准曲线法
  2.多组分的定量分析
  根据吸收光度具有加和性的特点,在同一样品中可以同时测定两个或两个以上组分,假设要测定样品中有两个组分,需要先测定两种纯组分的吸收光谱,对比其最大吸收波长,并计算出对应的吸光系数。两种纯组分的吸收光谱可能有三种情况。
  (1)吸收光谱不重叠(2)吸收光谱部分重叠(3)吸收光谱相互重叠

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