可见分光光度法
分光光度分析有两种,一种是利用物质本身对紫外及可见光的吸收进行测定,使用仪器有
紫外可见分光光度计,另一种是生成有色化合物即显色以后测定。虽然不少无机离子在紫外和可见光区有吸收,但因一般强度较弱所以直接用于定量分析的叫少,许多稀土元素在200-1000nm波长范围内有特征吸收光谱,可以利用稀土元素本身的吸收进行光度分析。
加入显色剂使待测物质转化为在近紫外和可见光区有吸收的化合物来进行光度测定,是目前应用最广泛的测试手段,在分光光度法中占有重要地位。
显示反应
在光度分析中,将试样中被测组分转变成有色化合物的反应叫显色反应,能与被测组分生成有色物质的试剂称为显色剂,显色反应分为两类:络合反应和氧化还原反应。其中络合反应是最主要的显色反应
对显色反应的要求:1、选择型号,一种显色剂最好只与一种被测组分起显色反应,或显色剂与干扰离子生成的有色化合物的吸收峰与被测组分的吸收峰相距较远,这样干扰较少。
灵敏度高,即有色化合物的摩尔吸收系数大。
有色络合物的离解常数要小,有色络合物的离解常数越小,络合物就越稳定,络合越稳定,光度测定的准确度就越高,并且还可以避免或减少试样中其它离子的干扰。
有色络合物的组分要恒定,化学性质要稳定。
如果显色剂有颜色,则要求有色化合物与显色剂之间的颜色差别要大,以较少试剂空白。一般要求有色化合物与显色剂的最大吸收波长之差在60nm以上。
显色反应的条件要易于控制,如果条件要求过于严格,难以控制,测定结果的再现性就差。
显色剂
无机显色剂 许多无机试剂能与金属离子发生显色反应用于光度分析,但由于灵敏度等原因,具有实用价值的仅有几类。
有机显色剂 大多数有机显色剂本身为有色化合物,与金属离子反应生成的化合物一般是稳定的螯合物,显色反应的选择性和灵敏度都较高,有些有色螯合物易于溶于有机溶剂,可进行萃取光度法有机显色剂种类很多,不断有新型的有机显色剂研制出来。
多远配合物显色体系
近年来,形成多远配合物的显色体系受到关注,多远配合物是指三个或三个以上组分形成的配合物,利用多元配合物的形成可提高分光光度测定的灵敏度,改善分析特性,目前应用较多的是三元配合物,以形成三元配合物为基础,对原有的分析方法进行改进,有一些成熟的方法已纳入新修改的国家标准中。三元配合物在光度分析中应用较多的有:三元混配化合物、三元离子缔合物、三元胶束配合物、三元杂多酸配合物