分光光度计测量原理是物质分子对可见光或紫外光的选择性吸收在一定的实验条件下符合朗伯比尔定量。
仪器结构
分光光度计一般由以下几个部分组成：
光源 光源的功能是提供稳定的、强度大的连续光。钨灯或卤钨灯在可见光区发光强度大，被用作可见光区测定的光源，氢灯在紫外光区发光强度大，被用作紫外光区测定的光源。
分光系统 跟光系统也称单色器，其作用是将光源提供的混合光色散成单色光。现代分光光度计基本上都采用光栅作为分光元件，配以入射狭缝、准光镜、投影物镜、出射狭缝等光学器件构成分光系统。
样品池 样品池即吸收池，也叫比色皿，用光学玻璃或石英制成，用于盛放试样溶液供测定用，普通单波长分光光度计测量时需要两个比色皿，一个装待测液，另一个装参比液。
检测显示系统 检测显示系统可将透过吸收池的光转换成电信号，经放大或对数转换后，以模拟或是数字信号的形式显示吸光度（或浓度）值
使用方法
打开分光光度计电源开光，开启比色室盖，预热二十分钟
将盛有参比液与待测液的比色皿放在比色皿架上，并转入比色室
调节波长调节旋钮，选择合适的波长。转动灵敏度调节旋钮，选择合适的灵敏度
拉动比色皿架拉杆，将参比液对准光路
开启比色皿室盖，旋钮显示器上透光率为0.
关闭比色皿室盖，用“100”旋钮11调节显示器I上透光率为100。此时将侧量选择开关3转为“吸光度”，则显示器1上显示值应为0.000.
拉动比色皿架拉杆10，将待测液对准光路，显示器1上指示的数字就是待测液的吸光度。
若需改变波长进行测量，则每次改变波长时，必须重复步骤③~⑥的操作.
若分光光度计需测定浓度，可将测量选择开关3置于“浓度”，再将已知浓度的标准样放人光路，用浓度调节旋钮5调节浓度值与标样浓度值相等。此后，拉动比色皿架拉杆10，使待测液进入光路，显示器1上指示的数字就是待测液的浓度。
测定完毕后，取出比色皿，洗净，晾干后放人比色皿盒中;注意清洁比色架和比色室，关闭仪器电源后，盖上防尘罩。
注意事项
①
分光光度计连续使用时间不宜超过2h，若需长时间使用，应每连续使用2h后，关闭仪器电源恢复30min.
②比色皿在使用中应保持透光面的清洁，切勿用手指触摸透光面，也不要用粗糙的纸擦拭透光面。比色皿不能加热或烘烤，以免影响光程。
