荧光
分光光度计
紫外可见分光光度法中，分子吸收了紫外可见光谱区的辐射后，跃迁至激发态，处于激发态的分子由于不稳定而返回至基态基态，这一过程如果以发射辐射的方式释放出能量，则称为荧光和磷光现象。如果对样品产生的荧光进行检测，则为荧光光谱法。荧光分光光度计的结构与紫外可见分光光度计类似，光源发射的光经单色器分光后照射到样品池，样品分子发出的荧光再经单色器分光后被检测。
荧光分光光度计与紫外可见分光光度计类似，荧光光谱法中，样品以溶液状态盛放于石英吸收池中，这种石英吸收池四面均可以透光，紫外可见光谱法中使用的吸收池只有平行的两面可以透光
与其他分光光度计不同，荧光分光光度计中入射光和荧光的波长都不是单一不变的，因此既可以得到激发光谱，又可以得到发射光谱。
1、激发光谱
改变入射光的波长，固定所检测的荧光波长，可得到激发光谱，图谱中横坐标为入射光的波长，纵坐标为固定波长荧光的强度。
2、发射光谱
固定入射光的波长和强度，检测不同波长荧光的强度，可得到发射光谱，图谱中横坐标为荧光的波长，纵坐标为荧光的强度。激发光谱和发射光谱都是分子结构的特征反映，都可用于鉴别荧光物质。但激发光谱主要用于选定入射光的波长，而后在此波长下测定发射光谱。
荧光分光光度计的应用
荧光分光光度计用于分析荧光物质和那些能够与荧光物质以共价或非共价形成结合的物质，也分为定性分析和定量分析两个方面，在定性分析方面，可将荧光激发光谱图和荧光发射光谱图与标准谱图比较，从而确定物质结构。目前，荧光分光光度计主要用于定量分析，其原理是荧光强度与荧光物质浓度呈线性关系，可利用标准曲线法进行定量分析。
荧光物质多为长共轭体系的结构，如芳香族化合物、含有长共轭双键的脂肪烃等。有些物质本身不能发射荧光，但与某些荧光试剂结合后，也可发射荧光。例如可将某些化合物通过化学反应修饰上荧光试剂，使其可用于荧光光谱法；有些无机离子与具有共轭结构的小分子形成配合物后可运用荧光光谱法进行定量分析；利用溴化乙锭的荧光性能来研究小分子与双螺旋DNA结构的结合等。
荧光光谱法在药学领域的应用较广，许多药物分子都能够发射荧光，维生素中的维生素A、维生素B1等；抗生素中的青霉素、金霉素、四环素、抗霉素等；麻醉药中的大麻醇、吗啡等；镇痛药中的对乙酰氨基酚、阿司匹林等都可运用荧光光谱法进行鉴定和定量分析。
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