紫外可见分光光度计的基本结构和工作过程
光源提供连续辐射，经过单色器变成特定波长的光（波长范围一般为200-800nm），此光照射到样品池时，使样品分子的外层电子发生跃迁而被吸收，被吸收后变弱的光到达检测器，光信号变成电信号，最终由信号输出系统给出实验结果，在紫外可见光区域内产生吸收的基团通常含有π轨道，紫外可见光谱法的定性分析和定量分析也是基于这些基团所发生的光谱吸收
岛津UV-3600型紫外可见分光光度计
在紫外可见光谱法中，选择合适的溶剂将样品配制成溶液，盛放于样品池中，样品池一般有石英和玻璃两种材质，石英样品池对紫外光和可见光都是透明的，可用于两个光区：玻璃样品池只能用于可见光区，但价格便宜。
紫外可见分光光度计通常分为单光束分光光度计、双光束分光光度计和双波长分光光度计三种类型。
1、单光束分光光度计
一次实验只能提供某一特定波长的光，它的特点是结构简单、光源能量损失和机械振动小，因而灵敏度高，但由于样品溶液和参比溶液不是同时进行测量的， 实验结果受仪器的不稳定性影响大。此外由于每一波长都必须进行溶剂的校正，所以单光束分光光度计不能实现连续波长的扫描，一般只能在一个波长下进行吸光度的测量。
2、双光束分光光度计
光源经单色器后被分成相同强度的两束光，分别通过参比溶液和样品溶液，这种方式即时的扣除了背景溶液的干扰，可以对样品进行连续波长的扫描
3、双波长分光光度计
同一光源发射的光经过两个单色器，分成两种不同波长的光，这两束光通过切光器后交替照射样品池，到达检测器后，两个波长处的吸光度差值与样品浓度成正比。
与双光束分光光度计相比，双波长分光光度计对背景吸收的扣除更有优势，使用双光束分光光度计时，很难找到两个完全相同的样品池，分析复杂样品时也很难找到与之匹配的背景溶液。双波长分光光度计使用一个样品池，不会因为样品池差异而产生影响，在分析浑浊样品时，可以自动扣除浑浊度引起的背景吸收，因此，该类仪器在分析浑浊样品时很有优势。
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